午夜大片网,日韩二区成人网站,欧美一区二区三区四区精品日本,超碰伊人 一区

Transwell細胞培養(yǎng)設(shè)計

實驗一:探究共培養(yǎng)條件分泌組是否有變化即細胞A和細胞B在共培養(yǎng)條件下其各自分泌組是否受到影響(暫且不討論誰對誰的影響)。
設(shè)計實驗:
1.使用Transwell培養(yǎng)技術(shù),上層培養(yǎng)細胞A(細胞數(shù)設(shè)置為1*10^5個 <舉例>)下層培養(yǎng)細胞B(細胞數(shù)設(shè)置為2*10^5個 <舉例>)共培養(yǎng)h小時,從培養(yǎng)液中提取分泌蛋白(記為蛋白ⅰ)。

Transwell  1
2.相同培養(yǎng)條件 (培養(yǎng)基含量,細胞數(shù),培養(yǎng)時間,溫度等)設(shè)置兩個Transwell:⑴上層培養(yǎng)細胞A(細胞數(shù)設(shè)置為1*10^5個 <舉例>)下層不放置細胞,⑵上層不放置細胞,下層培養(yǎng)細胞B(細胞數(shù)設(shè)置為2*10^5個 <舉例>),培養(yǎng)h小時,從培養(yǎng)液中提取分泌蛋白(記為蛋白ⅱ)。

Transwell 2-⑴                Transwell 2-⑵
3.質(zhì)譜分析蛋白ⅰ和蛋白ⅱ的差別,初步分析共培養(yǎng)條件下分泌組是否影響。
4.置換細胞A ,細胞B培養(yǎng)的上下層條件,相同方法培養(yǎng)細胞,打質(zhì)譜分析蛋白,分析結(jié)果是否與實驗一有差別,進一步分析原因。

總結(jié):該方法盡可能的同一了共培養(yǎng)和單獨培養(yǎng)的差異,即排除了其他影響條件,只對比在共培養(yǎng)和單獨培養(yǎng)條件下分泌組的變化 ,從而為得到可信數(shù)據(jù)提供了條件,對照分析了在共培養(yǎng)條件下與單獨培養(yǎng)條件下分泌組的變化情況。缺點:由于細胞均未標記,即便結(jié)果顯示共培養(yǎng)和單獨培養(yǎng)分泌組確實有變化,仍無法得出兩種細胞誰影響誰,由此,可利用標記培養(yǎng)基的方法,繼續(xù)優(yōu)化實驗。
實驗二:優(yōu)化設(shè)計,將單獨培養(yǎng)的細胞A培養(yǎng)基用Leud-d標記,細胞B用Lys-C13 標記,而對共同培養(yǎng)的Transwell不做任何標記。如圖所示:
 
Transwell 1
 
Transwell 2-⑴                  Transwell 2-⑵
同實驗一,經(jīng)過相同條件的培養(yǎng),提取分泌組,質(zhì)譜分析(另做A  B細胞上下層交換的實驗),對比單獨培養(yǎng)并分別標記與共培養(yǎng)但不標記條件下分泌組的變化,從而得到兩種細胞在共培養(yǎng)條件下是否影響彼此分泌組的變化,并且可以得出是誰影響誰,還是兩種細胞都有影響。 
色综合中文字幕不卡| 欧州XXX高潮喷水| 国产精品成人无码a?v毛片| 亚洲精选国产专区| 国产精品色欲AV| 亚州AV永远无码精品| 综合在线网站国产欧美| 黄色理论网址| 日本黄色成人网| 亚洲国产一二三精品无码| 手机免费不卡一区| 国内精品九九久久| 天天干天天爱天天射天天日| 国产三级久久久久久| com.国产精| 中文字幕一级毛片无码视频| 国产高清美女一级a毛片久久| 搞学生妹精品| 日韩欧美国产专区| 日韩av电影网站| 中文字幕视频第二页| 四虎免费官方看黄片| 精品老司机久久精品| 国产女主播一区二区在线观看| 国产又色又爽又黄刺激的影视| 久热re在线视频精品免费| 色综合av| 久久精品费精品国产一区二区| XXXX四川BBBB| 日韩高清欧美有码| 久久国产精品国产自线拍免费| 国产亚洲日韩在线播放更多| 石家庄市| 久久久黑人| 国产高清无套内谢| 奶水少妇XXXX色| 国产成人三级对白视频在线播放| 婬乱丰满熟妇XXXXX性春色| 欧美日韩—| 韩日亚洲一区| 精品伊人久久大香线蕉综合|