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SOP用于微生物培養(yǎng)的繼代培養(yǎng)和維持

1.0目標(biāo)

制定繼代培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)的程序。

2.0范圍

此SOP適用于質(zhì)量控制部門。

3.0責(zé)任

微生物學(xué)家
 

4.0問責(zé)制

品管部主管。

5.0程序

5.1 資料來源:用于微生物分析的生物應(yīng)從G家或G際認(rèn)可的機(jī)構(gòu)采購。
5.2 批準(zhǔn)的供應(yīng)商: NCIM,印度浦那。
5.3 供應(yīng)方式:冷凍干燥的培養(yǎng)物以真空密封的玻璃安瓿瓶提供,或在斜面上繼代培養(yǎng)。

5.4為了復(fù)興文化

5.4.1按照SOP中制備微生物培養(yǎng)基的程序準(zhǔn)備指定的生長培養(yǎng)基。
5.4.2按照SOP微生物進(jìn)入和退出程序SOP中規(guī)定的程序?qū)⑴囵B(yǎng)液轉(zhuǎn)移到微生物檢測區(qū)域。
5.4.3 用70%異丙醇消毒培養(yǎng)斜面。5.4.4取下棉塞,并仔細(xì)點(diǎn)燃管頸。
5.4.5將一圈凍干培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到10 ml的0.9%無菌鹽水溶液中。
5.4.6再次點(diǎn)燃管頸以避免污染,并正確更換棉塞。
5.4.7充分混合接種管以分散細(xì)胞,并在所需溫度下孵育18-24小時(shí)。

5.5主偏斜準(zhǔn)備

5.5.1 按照《制備微生物培養(yǎng)基的SOP》中規(guī)定的程序,為不同的微生物準(zhǔn)備所需的培養(yǎng)基傾斜液,并在每個(gè)傾斜度上提及培養(yǎng)基的名稱。
5.5.2 按照SOP《微生物進(jìn)出程序》中規(guī)定的程序,將斜面和孵育的培養(yǎng)物懸浮液帶入微生物測試區(qū)域。
5.5.3從24小時(shí)的培養(yǎng)液懸浮液中,將一圈培養(yǎng)物劃線至上述各個(gè)培養(yǎng)基斜面上,并在指定的溫度下孵育。因此,一種是大師文化,第二種是畜牧文化,第三種是工作文化,在指定的條件下進(jìn)行孵化。
5.5.4標(biāo)記傾斜
5.5.5將生長的培養(yǎng)物保存在2至6°C的冰箱中。
5.5.6從10毫升的培養(yǎng)懸浮液中制備4個(gè)主培養(yǎng)斜面,1個(gè)原種培養(yǎng)斜面和1個(gè)工作培養(yǎng)斜面。
5.5.7按該模式進(jìn)行亞培養(yǎng),以使每月傾斜一次。
5.5.8傳代時(shí)檢查母體培養(yǎng)的純度。還用同樣的方式通過菌落形態(tài)和革蘭染色每月檢查一次養(yǎng)殖的純度。

6.0縮寫

6.1 NCIM:G家工業(yè)微生物集合
6.2 QC:質(zhì)量控制
6.3部門:部門
6.4 SOP:標(biāo)準(zhǔn)操作程序
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